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【特別推薦】:糖化血清白蛋白(GA)測定試劑使用說明、性能指標  
發布者:idrfz.chen   
 
(本試劑僅用于科研、實驗、技術支持,不直接用于臨床診斷)

【簡介】

用于全自動法測定糖化白蛋白含量。

糖化蛋白半衰期較短,測定糖化白蛋白濃度可有效反映患者過去1-3周內平均血糖的水平,并不受臨時血糖濃度波動的影響,為臨床糖尿病人的診斷和較長時間血糖控制水平的研究,提供一個很好的指標。

【測定方法】

氧化酶法

【測定原理】

樣本中糖化白蛋白在被特異性的蛋白酶裂解釋放出糖化氨基酸,經氧化酶氧化后產生過氧化氫,過氧化氫經Trinder’S系統顯色后其顏色深淺與糖化血清白蛋白含量成正比,與標準比較后可求得糖化白蛋白含量。

【試劑盒組成】

 

   

   

   

試劑

液體雙試劑

試劑I: 試劑II=4:1

GOODS緩沖液、蛋白酶、氧化酶、4-AAPTOOS

適量

GA校準品

凍干1ml

糖化白蛋白、穩定劑

見標簽

GA質控品

凍干1ml

糖化白蛋白、穩定劑

見標簽

【樣本要求】

血清、血漿(EDTA、肝素、檸檬酸)以及血糖用血漿(2種混合:NaF+肝素,NaF+EDTA; 3種混合:NaF+肝素+EDTA)。樣本采集后,應盡快分離血清或血漿。樣本置于2~8可穩定14天,-20℃可穩定5周。

【測定步驟】

1.本試劑為液體雙試劑,可直接使用。

2.測定參數:波長:546nm;光徑:10mm;溫度:37

3.測定方法:

加入物

測定管(U

標準管(S

空白管(B

R1 (μl

200

200

200

標本  (μl

5

-

-

標準液(μl

-

5

-

蒸餾水(μl

-

-

5

混勻,置37孵育3-5分鐘,讀取各管吸光度A1

R2(μl

50

50

50

混勻,置37℃繼續反應5min,讀取各管吸光度A2,計算ΔA=A2-A1

4.上機參數:

程序:

終點法

血清+R1反應時間:

3~5min

標本

5μl

主波長:

546nm

血清+R1+R2反應時間:

5min

R1

200μl

輔助波長:

660nm

反應溫度:

37

R2

50μl

5.計算:

糖化白蛋白含量(μmol/L =  [A標本-A空白/ A校準-A空白]  × 校準值

【性能指標】

1 空白吸光度 0.100

2 線性范圍0.3-53.2 g/L  5-800μmol/L

3 批內/分析內精密度  CV5%;批間相對極差 7%;

4 準確性  相對偏差不超過±10%。

5 抗干擾性  血清膽紅素<29 mg/dLTG<750mg/dL、血紅蛋白<200 mg/dL、膽汁酸<8 mg/dL、尿酸<33mg/dL、葡萄糖<1800 mg/dL時,對測定無顯著影響。

6、方法對照  本試劑盒檢測方法與色譜法進行相關性比較試驗,結果如下:Y=1.0122X+0.3123r=0.9902n=100Y為本法試劑,X為色譜法。

【注意事項】

1、試劑變混濁或空白吸光度值>0.100時,將不能使用,應棄去;

2、建議各實驗室建立自己的正常值范圍;

3、試劑與樣本量可根據需要按比例調節;

4、請勿用嘴直接吸取試劑,避免接觸皮膚、眼睛及粘膜,一旦接觸,應即用水沖洗污染部位;

5、使用配套的校準品校準,校準周期為30天,更換試劑批號時需要重新校準。建議使用正常值和病理值生化質控血清進行室內質控,測定的控制值應在確定的限制范圍內,若控制值失控,實驗室應采取適當的糾正措施。

6當標本濃度超過檢測范圍時,應用生理鹽水稀釋標本后再進行檢測,標本值為測定值乘以稀釋倍數。

【參考范圍

正常人血清 

糖化白蛋白(GA: 3.70-7.64 g/L 56-115μmol/L;    糖化白蛋白/白蛋白( GA/ALB: 11.00~16.00%

建議各實驗室制定自己的參考范圍。

【儲存條件與有效期】

未開封的試劑在2-8避光條件下可穩定14個月。

試劑開封后,存放在分析儀試劑倉中(2-8)的試劑在30天內性質穩定。

【參考文獻】

1Kazuyoshi Ikeda, etal, Clinical Chemistry,  1988, 44:256-263.

2King H, etal, Diabetes Care,  1988, 21:1414-1431.

 

 

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